Зміст:
- Коли необхідний аналіз
- Методи визначення
- Метод конглютинации
- Метод цоликлонов
- Прискорений метод
- Желатиновий метод
- Резус фактор батьків
Резус-фактор крові людини показує наявність або відсутність на поверхні еритроцитів специфічного протеїну Rh. Якщо Rh присутній, то кров називають резус-позитивної Rh+, якщо відсутній, то Rh-. Білкова молекула Rh присутній на мембрані еритроцитів 85% землян. Визначення резус фактора крові проводять для запобігання можливої несумісності при гемотрансфузії.
Вплив резус-фактора на стан здоров’я людей не встановлено. Ознака передається у спадок і не змінюється все життя.
Коли необхідний аналіз
Інформація про присутність або відсутність Rh factor необхідна, якщо потрібно гемотрансфузія або хірургічна операція, або жінка завагітніла. Аналіз визначення резус-фактора крові проводиться під час визначення крові на групу.
Якщо відбувається трансфузія резус-позитивної донорської крові резус-негативним реципієнту, виникає резус-зіткнення. Імунна система організму реципієнта починає продукувати антитіла до резус-позитивних еритроцитів, вони руйнуються. Таке явище отримало назву «гемоліз». Тому, при гемотрансфузії необхідно, щоб кров віддає і приймаючого збігалася за групою і резусом.
Особливу небезпеку представляє резус-конфлікт під час вагітності резус-негативних матерів. Якщо у резус–негативної матері формується резус-позитивний плід, імунна система виробляє антитіла до еритроцитів ембріона і руйнує їх. Плід, у такому випадку, гине. Ризик такого розвитку подій найбільш ймовірний при другій та наступних вагітностях. Розроблені методи запобігання від резус-конфлікту Rh – матері і Rh+плоду, що дозволяють зберегти життя і здоров’я майбутньої дитини.
При вагітності дуже важливо знати резус фактор крові
Визначення Rh крові відбувається під час відбору проб крові з пальця або вени для стандартного аналізу крові.
Методи визначення
Суть всіх методів визначення резус-фактора полягає в проходженні реакції склеювання (аглютинації) еритроцитів.
Розрізняють чотири методи визначення резус-фактора:
- Конглютинацией на судинах Петрі;
- Визначення резус-фактора крові цоликлонами;
- Експрес – метод;
- Метод желатиновий.
Метод конглютинации
Для проведення аналізу конглютинативным методом використовують судини Петрі, піпетки одноразові, фізрозчин, стандартні serum до всіх груп крові.
Проведення аналізу полягає в наступних діях лаборанта:
- Наносять на поверхню чашки Петрі три ряди(серії) крапель реагенту, по дві в кожному;
- У кожну серію додають краплю випробуваної крові і по крапельці контрольних позитивних і негативних контрольних еритроцитів;
- Змішують і витримують на водяній бані при 47°C десять хвилин;
- Визначають результат. Позитивним вважають випадання пластівців, а негативним їх відсутність.
Метод цоликлонов
Фактор резус виявляють за допомогою моноклональних антитіл. Це імуноглобуліни, які продукуються клітинами, що відбулися від однієї попередниці, тобто моноклоном. Реагенти, виділені з таких клітин, одержали назву цоликлоны.
Ампули з цоликлонами
Визначення резус-фактора крові цоликлонами проводять в натуральній крові. Використовують метод прямого скучування на планшеті. В лунку пластини вносять одну велику краплю цоликлона, поруч поміщають краплю крові невеликого розміру. Кров змішують з реагентом при погойдуванні планшета. Перші ознаки склеювання еритроцитів з’являються через 15 секунд, але результат визначають через три хвилини. Позитивним для резусу вважають появу крупиць згорнулася крові. Всі дослідження проводять в лабораторії при температурі 15-25°С і хорошою освітленості.
Прискорений метод
Використовують універсальну serum антирезус. Визначення резус фактора крові методика експрес включає:
- Внесення в пробірку краплі крові і двох крапель препарату «антирезус»;
- Перемішують вміст пробірки поворачиванием без струшування. Вміст рівномірно поширюється по стінці пробірки;
- Додавання в пробірку фізіологічного розчину в кількості близько 3 мл і перемішування вмісту при неодноразовому перевертанні посуду;
- Спостереження хлопьеобразования. Там, де вони формуються, кров Rh+.
- Цей метод швидкий, але не точний. Псевдопозитивная реакція з Rh – еритроцитами проявляється у разі знаходження на поверхні еритроцитів антигенів, ставлення до Rh не мають. Паралельно проводять ще один тест з контрольною есенцією підсилювача. Якщо і в цьому випадку утворюються пластівці, результат визнають недостовірним і дослідження повторюють з новим реагентом.
Желатиновий метод
Широко використовують желатиновий прискорений метод визначення Rh. Він полягає в добавці до крові однієї краплі 10 % есенції желатину, десятихвилинної витримки пробірок в термостаті при +37, з подальшим додаванням підігрітого ізотонічного р-ра NaCl. Желатин перешкоджає утворенню неспецифічної аглютинації.
Резус фактор батьків
Комбінація хромосом, впливає і на стать майбутньої дитини і на його резус-орієнтацію. Існує ймовірність визначення резус фактора крові по батькам. Якщо мати і батько позбавлені резусного антигену, то і їхні діти, будуть мати Rh-. Резус-позитивні гени мають доминантностью, тобто, перевагою перед резус – негативними.
Якщо в одного з батьків Rh+, а в іншого Rh-, шанс на здобуття дитиною Rh+ становить 75%, а на народження з Rh- , відповідно, 25%. Якщо у обох батьків Rh+, у п’ятнадцяти випадках з шістнадцяти, у їхніх чад теж будуть Rh+. І, тільки в одному випадку з шістнадцяти, існує ймовірність появи на світ немовляти з Rh-.
Відомості про резус-факторі необхідні, якщо є показання для переливання крові. Гемотрансфузія можлива тільки при використанні сумісної з резусом, і групі. Визначення Rh-factor у вагітних є запорукою попередження ризиків для несформованого плоду. Найкраще знати свій Rh на етапі планування вагітності, щоб виключити резус-зіткнення між Rh-матір’ю і Rh+плодом.