Визначення групи крові та резус-фактора за допомогою цоликлонов

Цоликлоны – це моноклинальные антитіла, отримані шляхом генної інженерії з крові стерильних мишей і застосовуються для визначення групи крові системи АВО. На відміну від стандартних сироваток, цоликлоны відрізняються дуже високою активністю і авидностью, тобто часом настання і вираженістю реакції аглютинації (склеювання). Основними цоликлонами є: анти-A, анти-B, анти-AB, анти-0 та інші. За ним визначають групи крові і резус-фактор.

Як проводиться

Визначення групи крові даним методом проводиться в лабораторії. Температура повітря в приміщенні повинна становити від +15 до + 25 градусів C. Дослідження повинне проходити при хорошому освітленні. Всі реагенти потрібно зберігати щільно закритими, оскільки при висиханні активність антитіл значно знижується. Не можна використовувати каламутні і містять пластівці реагенти. Для кожного з них потрібна окрема піпетка. Процедура проводиться на планшеті або тарілці білого кольору, поверхня яких повинна добре змочуватися. Завдяки високій авідності та активності цоликлонов, є можливість застосування по одній серії анти-A і анти-B реагентів.

На планшеті роблять написи: анти-A і анти-B. Під відповідні написи капають цоликлоны в кількості приблизно 0,1 мл Реагент анти-A має жовтувато-рожевий колір, анти-B – синій. Поряд з моноклональними антитілами капають по краплі крові і змішують її з реагентами скляною паличкою або куточком предметного скла. Перед змішуванням наступної пари крапель паличку або скло ретельно промивають і витирають насухо.

Протягом 2,5 хвилин ведуть спостереження за аглютинацією, при цьому планшет злегка похитують. Потім оцінюють результат. Треба сказати, що для спостереження за процесом не потрібні ніякі пристосування. Агглютинаты добре видно неозброєним оком, вони швидко зливаються і утворюють великі пластівці. Якщо склеювання не відбувається, крапля реагенту рівномірно забарвлюється в червоний колір.

  • Якщо аглютинація відсутня (і з цоликлоном анти-A і анти-B), в еритроцитах немає ні антигену A, ні B. Це I група.
  • Якщо аглютинація є лише з цоликлоном анти-A, в еритроцитах міститься тільки антиген A. Це кров II групи.
  • Якщо аглютинація спостерігається лише з цоликлоном анти-B, в червоних клітинах є тільки антиген B. Це III група.
  • Якщо аглютинація відбулася c цоликлоном і анти-A і анти-B, в еритроцитах є обидва антигену. Для виключення аутоагглютинации проводять контрольну процедуру: змішують ізотонічний розчин натрію хлориду (0,1 мл) і досліджувану кров (0,01 мл). Якщо аглютинація відсутня, то це IV група.
  • Визначення резус-фактора


    Цоликлоны мають ряд переваг перед стандартними сироватками

    На планшет наносять велику краплю реагенту анти-D-супер. Поруч – маленьку (в 10 разів менше) досліджуваної крові, яку змішують з реагентом і оцінюють результат. Якщо почалася аглютинація, кров є резус-позитивною, при негативному резус-факторі аглютинації не відбувається.

    Корисне відео:


    Висновок

    Моноклональні реагенти для визначення групи крові мають явні переваги в порівнянні зі стандартними изогем-агглютинирующими сироватками. Вони забезпечують дуже точний результат, а сама процедура безболісна, безпечна і займає дуже мало часу.

    Також Вам буде цікаво:

    Leave a Comment