- Класифікація методів лабораторної діагностики хвороби
- Прямі тести
- Серологічні методи
- Алгоритм діагностики сифілітичної інфекції на різних стадіях
- Правила отримання аналізу на сифіліс
- Аналіз спинно-мозкової рідини
Сифіліс супроводжується численними симптомами і має велику кількість клінічних форм. Його розпізнавання грунтується на комплексному клініко-лабораторному обстеженні пацієнта. Загальний аналіз крові при сифілісі несе мало інформації, тому для діагностики хвороби не застосовується.
Для аналізів можуть братися такі матеріали:
- кров з пальця і вени;
- ліквор — спинно-мозкова рідина;
- виділення твердого шанкра (виразки);
- ділянки регіонарних лімфовузлів.
Вибір матеріалу і методу діагностики залежить від стадії хвороби. Про те, які аналізи здають на сифіліс, ми поговоримо в наступній рубриці.
Класифікація методів лабораторної діагностики хвороби
У початковій стадії можна використовувати бактеріоскопічний метод, заснований на визначенні збудника – блідої трепонеми – під мікроскопом. В подальшому широко використовуються серологічні тести, основані на визначенні мікробних антигенів і виробляються організмом антитіл у біологічному матеріалі.
Бактеріологічні дослідження не проводять, так як збудник сифілісу дуже погано росте на поживних середовищах в штучних умовах.
Всі методи виявлення трепонеми, тобто види аналізів на сифіліс, діляться на дві великі групи:
1. Прямі, які безпосередньо виявляють сам мікроб:
- темнопольная мікроскопія (виявлення трепонем на темному тлі);
- RIT-тест – зараження досліджуваним матеріалом кроликів;
- полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР), обнаруживающая ділянки генетичного матеріалу мікроорганізму.
2. Непрямі (серологічні), засновані на виявленні антитіл до мікроба, які виробляються організмом у відповідь на інфікування.
Серологічні аналізи діляться на дві групи
Нетрепонемні:
- реакція зв’язування комплементу з кардиолипиновым антигеном (РСКк);
- реакція мікропреципітації (РМП);
- тест швидких плазмових реагинов (RPR);
- проба з толуїдиновим червоним.
Трепонемные:
- реакція зв’язування комплементу з трепонемным антигеном (РСКт);
- реакція іммобілізації трепонем (РІТ або РІБТ);
- реакція імунофлуоресценції (РІФ);
- реакція пасивної гемаглютинації (РПГА);
- імуноферментний аналіз (ІФА);
- імуноблотинг.
Методики цих аналізів досить складні, тому ми зупинимося в основному на те, коли вони проводяться і наскільки точну інформацію дають.
Відразу скажемо, що основа діагностики сифілісу – серологічні методи. Як називається аналіз на сифіліс: у кожному разі обстеження може включати різні методики. Нижче ми більш детально розповімо про них.
Прямі тести
Переконливо доводить наявність трепонем їх виявлення під мікроскопом. Ймовірність сифілісу при цьому досягає 97%. Разом з тим мікроби можна виявити лише у 8 хворих з 10, тому негативний тест не виключає захворювання.
Діагностика проводиться у первинному і вторинному періодах, коли є твердий шанкр або шкірний висип. У виділеннях цих заразних елементів і шукають збудників хвороби.
Більш ефективний, але разом з тим більш дорогий і складний аналіз – виявлення трепонем після попередньої обробки їх флуоресцентними антитілами. Це речовини, «прилипають» до мікробів і утворюють «світіння» їх в полі мікроскопа.
Чутливість методів знижується при великій тривалості хвороби, обробці виразок і висипу антисептиками, а також після лікування.
Біологічний метод діагностики RIT высокоспецифичен, але доріг, а результат виходить лише через тривалий час, коли у зараженої тварини розів’ється захворювання. В даний час метод практично не використовують, хоча він практично найточніший з усіх. Відмінний аналіз крові на сифіліс для виявлення генетичного матеріалу трепонем – ПЛР. Єдине обмеження його – відносна дорожнеча діагностики.
Серологічні методи
Нетрепонемні тести
РСКк і РМП
Найвідоміший з цих аналізів – реакція Вассермана. Це спосіб швидкої діагностики (експрес аналіз на сифіліс), заснований на подібній реакції антитіл з крові хворої людини на самі трепонеми і на кардіоліпін, отриманий з бичачого серця. В результаті такої взаємодії антитіл і кардіоліпіну утворюються пластівці.
У Росії даний аналіз практично не використовується. Його замінила реакція мікропреципітації. Недоліком методу є його низька специфічність. Хибнопозитивний аналіз крові на сифіліс зустрічається при туберкульозі, хворобах крові, системному червоному вовчаку, при вагітності, після народження дитини, під час менструальної кровотечі і в багатьох інших випадках. Тому при позитивній RW застосовують більш точні методи діагностики.
Після зараження реакція стає позитивною через два місяці. При вторинному сифілісі вона позитивна практично у всіх хворих.
Подібний механізм має реакція мікропреципітації, що замінила реакцію Вассермана. Вона недорога, легко нездійсненна, швидка в оцінці, але теж може давати хибнопозитивний результат. Ці два тіста використовують як скринінгові.
РМП стає позитивною через місяць після появи твердого шанкра. Для її проведення використовується кров з пальця.
Може аналіз на сифіліс бути помилковим? Звичайно, так, особливо при використанні нетрепонемных тестів.
Причини гострих хибнопозитивних проб при використанні РМП:
- гострі інфекційні захворювання;
- запалення легенів;
- інфаркт міокарда;
- інсульт;
- травми та отруєння.
Хронічні хибнопозитивні результати часто виникають при наступних хворобах:
- туберкульоз;
- бруцельоз;
- лептоспіроз;
- саркоїдоз;
- ревматичні хвороби;
- інфекційний мононуклеоз;
- злоякісні пухлини;
- цукровий діабет;
- цироз печінки та інші.
Якщо виникають спірні аналізи – застосовують трепонемные серологічні тести для уточнення діагнозу.
RPR і проба з толуїдиновим червоним
Тест швидких плазмових реагинов (аналіз на сифіліс rpr) – ще один різновид реакції з кардиолипиновым антигеном. Її використовують у наступних випадках:
- скринінг населення;
- підозра на сифіліс;
- обстеження донорів.
Згадаємо ще й пробу з толуїдиновим червоним. Всі ці способи використовуються для оцінки ефективності лікування. Вони є полуколичественными, тобто зменшуються при видужанні і зростають при рецидиві інфекції.
Негативні результати нетрепонемных тестів з великою ймовірністю свідчать, що сифілісу у обстежуваного немає. Тому нетрепонемні тести застосовуються для оцінки излеченности. Перший такий аналіз слід здати через 3 місяці після завершення курсу лікування.
Трепонемные тести
Трепонемные тести засновані на використанні трепонемных антигенів, що значно підвищує їх діагностичну цінність. Вони застосовуються в наступних ситуаціях:
- позитивний скрінінг-тест (реакція мікропреципітації);
- розпізнавання хибнопозитивної результату скринінгу;
- підозра на сифіліс;
- діагностика прихованих форм;
- ретроспективна постановка діагнозу, коли пацієнт переніс захворювання раніше.
РІТ і РІФ
Найякісніші (високочутливі та високоспецифічні) – РІТ і РІФ. Недоліки цих методів – складність, тривалість, необхідність сучасного обладнання і навченого персоналу. У більшості вилікуваних пацієнтів трепонемные тести залишаються позитивними протягом багатьох років, і тому не можуть застосовуватися як критерій излеченности.
РИФ стає позитивною через два місяці після зараження. Якщо вона негативна – пацієнт здоровий, якщо позитивна – висока ймовірність захворювання.
РІТ особливо часто застосовується при позитивних результатах РМП, щоб виключити або підтвердити захворювання. Вона високочутлива і дозволяє з великою точністю сказати, чи є у пацієнта сифіліс, чи ні. Однак аналіз стає позитивним тільки через три місяці після інфікування.
Імуноблотинг
Імуноблотинг ще більш чутливий, ніж РИФ, але менш чутливий, ніж РПГА. Його використовують нечасто, в основному для діагностики сифілісу новонароджених.
Перелічені методи не підходять для скринінгу, тобто швидкого виявлення хвороби, тому що стають позитивними пізніше, ніж реакція мікропреципітації.
ІФА та РПГА
Сучасні високоінформативні стандартизовані методи діагностики сифілісу – ІФА і РПГА. Вони недорогі, швидко ставляться і перевіряються у великих кількостях. Ці тести можуть бути застосовані для підтвердження діагнозу.
Аналіз РПГА стає позитивним при первинному серопозитивном сифілісі, тобто при появі твердого шанкра (через місяць після зараження). Особливо він цінний при діагностиці пізніх, прихованих і вроджених форм захворювання. Однак РПГА повинна бути доповнена як мінімум одним нетрепонемным і одним трепонемным тестом для точності діагностики. Такий потрійний тест – найбільш достовірний аналіз на сифіліс. Недолік РПГА – збереження позитивної реакції протягом довгого часу, що не дозволяє застосовувати тест як критерій излеченности.
Аналіз ІФА на сифіліс стає позитивним вже через три тижні після захворювання. Мінусом ІФА є те, що він буває помилковий. Хибнопозитивна реакція виникає при системних захворюваннях, порушеннях обміну речовин, а також у дітей, народжених хворими матерями.
Недоліки серологічних методів призвели до розробки самих досконалих способів, які не дають помилок, але поки дорогих та рідко застосовуваних – газової хроматографії та мас-спектрометрії.
Алгоритм діагностики сифілітичної інфекції на різних стадіях
У первинному серонегативному періоді (до 2 місяців після зараження) проводять пошук трепонеми в темному полі або з використанням флуоресцентних антитіл.
При первинному серопозитивном, вторинному і прихованому сифілісі використовують РМП та ІФА, а як підтверджуючий тест – РПГА.
У пацієнтів з рецидивами вторинного сифілісу досліджують елементи висипу, намагаючись виділити з них трепонеми для мікроскопічного вивчення.
У третинному періоді РМП у третини хворих негативна. ІФА та РПГА позитивні, але вони можуть свідчити не про третинному сифілісі, а про перенесене раніше захворювання. Слабоположительный аналіз скоріше говорить про одужання, ніж про третинному сифілісі.
При виставленні діагнозу «вроджений сифіліс» беруть до уваги наявність хвороби у матері, різницю у показниках РМП у матері і дитини, позитивні ІФА та РПГА у новонародженого, імуноблотинг.
Обов’язково обстежуються на сифіліс вагітні жінки, особливо ті, у яких вже були пологи мертвим плодом, розвивається вагітність, ранні викидні. Їм проводиться РМП, ІФА, РПГА. Обстежують на наявність захворювання і перед перериванням вагітності.
Правила отримання аналізу на сифіліс
Щоб отримати направлення в лабораторію, потрібно відвідати свого дільничного терапевта. Якщо хочеться здати аналіз швидше, це можна зробити в приватній лабораторії без напрямки (наприклад, лабораторії Інвітро аналіз на сифіліс роблять швидко і анонімно).
Як здати аналіз на сифіліс? Кров здається зранку, натщесерце. Можна пити лише чисту воду.
Підготовка: за два дні до здачі аналізу потрібно виключити з харчування жирну їжу, особливо алкоголь.
Як беруть аналіз? звичайним способом з пальця або ліктьової вени.
Скільки робиться аналіз на сифіліс? Результат проби зазвичай буває готовий вже на наступний день. Розшифровка може бути взята у лікаря або в лабораторії.
Скільки дійсний аналіз? На строк до трьох місяців.
Якщо отримано позитивний результат, рекомендується звернутися до дерматовенеролога для дообстеження. Інтерпретація аналізів – робота лікаря, не варто ламати голову самостійно в пошуках правильної відповіді.
Аналіз спинно-мозкової рідини
У деяких випадках для діагностики нейросифіліса беруть аналіз ліквору.
Це обстеження призначається всім пацієнтам з прихованим сифілісом, якщо у них існують ознаки патології нервової системи, а також при прихованому і пізній нейросифіліс.
Крім того, аналіз виконується всім пацієнтам після одужання при збереженні у них позитивних серологічних реакцій. Ми вже писали в нашій статті, що таке явище трапляється нерідко.
Аналіз ліквору при сифілісі призначає та проводить тільки лікар.
Спинно-мозкову рідину отримують шляхом проколу між двома хребцями поперекового відділу. Її збирають по 4 мл в дві пробірки. Потім місце пункції обробляють йодом і накривається стерильною пов’язкою. Після пункції пацієнт повинен лежати на животі з піднятим ножним кінцем ліжка не менше 3-4 годин, потім він може лягти на бік. Постільний режим після пункції показаний протягом двох діб.
Ліквор з першої пробірки досліджують за допомогою загальноприйнятих реакцій на вміст білка, клітин, визначення ознак менінгіту (запалення мозкових оболонок).
Спинно-мозкова рідина з другої пробірки досліджується на вміст антитіл до трепонеме за допомогою реакції Вассермана, РМП, РІФ і РІБТ, про яких ми говорили вище.
За ступенем вираженості порушень розрізняють чотири види змін ліквору. Аналізуючи їх, лікар може зробити висновок про наявність різних форм ураження нервової системи (судинний нейросифіліс, сифілітичний менінгіт, менінго-васкулярний сифіліс, спинна сухотка, пізній мезенхимальный нейросифіліс), а також про одужання хворого з позитивними серологічними тестами.
loading…